人乳腺癌細胞（Human breast cancer cells）MCF-7是從一名69歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到，為貼壁上皮樣細胞。MCF-7保留了分化乳腺上皮的許多特征，常用于乳腺癌生物學研究，乳腺癌抗癌藥物篩選等方面研究。
MCF-7細胞
百迪貨號C5103
細胞培養(yǎng)方法
1.培養(yǎng)基
89%MEM培養(yǎng)基；10%胎牛血清（FBS）；1%青霉素-鏈霉素（P/S）；其他細胞添加劑
2.復蘇
（1）解凍：用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴；反復搖晃，迅速完成解凍；
（2）離心：噴灑75%酒精消毒后，在無菌環(huán)境下，打開凍存瓶，用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中，室溫1200 rpm離心3-5 min，細胞沉于離心管底部；
（3）培養(yǎng)：將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養(yǎng)基，輕柔懸起細胞，然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中，于37℃，5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
（4）觀察：每日觀察細胞生長狀態(tài)（培養(yǎng)基顏色、細胞貼壁情況、形態(tài)與密度等）并拍照。
3.傳代
細胞密度達80%-90%開始傳代
（1）清洗：無菌下吸出培養(yǎng)基，用37 ℃預熱的PBS清洗一次；
（2）消化：加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶令其浸潤所有細胞，室溫（或37 ℃）消化，顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化；
（3）離心：用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉(zhuǎn)移至10mL離心管中，在1200 rpm離心3-5 min；
（4）培養(yǎng)：無菌下棄上清液，加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細胞并移至T25培養(yǎng)瓶中；按1:2-1:3比例添加完全培養(yǎng)基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養(yǎng)瓶中，于37 ℃，5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
MCF-7細胞特點
成團簇的生長
由于MCF-7細胞是三維團簇的方式生長，復蘇和傳代后會重新附著為三維島（會有一些不會重新附著的簇）。生長最終會從島嶼狀慢慢擴散開來，隨著時間的推移，細胞會緩慢變成單層，這個時候細胞基本處于對數(shù)生長期。
生長緩慢
MCF-7人乳腺癌細胞是一種本身生長緩慢的細胞，傳代培養(yǎng)時注意細胞密度。當細胞培養(yǎng)至細胞 70~80% 的匯合度，即可進行分瓶處理，一般T25培養(yǎng)瓶建議1:2傳代，每周可傳代2~3次，如果細胞生長速度比正常的時候更慢，可以適當提高血清濃度。
貼壁率低
MCF-7細胞在復蘇、傳代后，細胞會有一些漂浮狀態(tài)，這些漂浮細胞是正常現(xiàn)象。一般復蘇、傳代培養(yǎng)3天后漂浮細胞會再繼續(xù)粘附貼壁，直到生長從島嶼擴散開來并且在培養(yǎng)瓶內(nèi)伸展開，通常在進行換液的時候我們會補加培養(yǎng)基，如果一定要全換液，可以通過離心收集懸浮細胞，并將懸浮細胞接種到新培養(yǎng)瓶中。
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