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常見技術FAQ
胰酶的保存條件?
?胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在2-8℃長期保存。 查看詳情
胰酶適用于哪些細胞消化?
?胰酶適用于消化細胞間質較少的軟組織和傳代細胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對纖維性組織和較硬的癌組織的效果差。其消化效果主要與pH值、溫度、時間、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關,也與細胞本身有關。不同胰酶產品中含有的組分或含量存在差異,需要參考相關資料進行使用。 查看詳情
何種情況下使用不含酚紅的胰酶?
?酚紅可以模擬固醇類激素(特別是雌激素)的作用。為避免固醇類反應,培養細胞尤其是哺乳類細胞時,建議用不含酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,在做流式細胞檢測時,也會使用不含酚紅的胰酶。 查看詳情
胰酶中的酚紅有什么作用?
?酚紅在培養基中被用來作為pH值的指示劑,中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。 查看詳情
胰酶消化完全的標準是什么?
?一般肉眼觀察貼壁細胞層,多半細胞呈沙狀移動,或大部分已經脫落,就可以停止消化。 查看詳情
為什么要對胰酶進行分裝?如何分裝儲存?
?多次使用同一瓶胰酶且反復凍融,會降低消化效果并有可能造成污染,因此有必要對胰酶進行分裝。胰酶分裝時遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則,避免在冷凍保存時,試劑體積膨脹導致容器破損而造成污染。 查看詳情
胰酶的使用濃度是多少?
?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。 查看詳情
細胞傳代時,血清為什么能終止胰酶消化?
?血清終止的原理是競爭抑制,就是用過量的血清中含有的蛋白與胰酶結合,不給胰酶消化細胞蛋白的機會。 查看詳情
胰酶的作用機理是什么?
?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鍵,通過在特定位置上降解蛋白,使細胞膜上和培養皿壁結合處蛋白降解,使兩者分離。這時細胞在自身內部細胞骨架的張力以及培養液表面張力作用下成為球形。 查看詳情
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