大鼠腎細(xì)胞（Rat renal proximal tubular epithelial cells）NRK-52E是從大鼠腎近曲小管分離出來(lái)的具有上皮形態(tài)的細(xì)胞系，為自發(fā)永生化細(xì)胞。NRK-52E是常用的腎臟細(xì)胞模型，有助于揭示腎臟疾病（如腎纖維化、鈉代謝紊亂、糖尿病等）的發(fā)展機(jī)制，以及評(píng)估藥物的腎臟毒性，對(duì)開(kāi)發(fā)新的治療策略和藥物安全性評(píng)價(jià)具有重要意義。
（1：3傳代；第2天）
培養(yǎng)細(xì)節(jié)
復(fù)蘇
（1）解凍：用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴；反復(fù)搖晃，迅速完成解凍；
（2）離心：噴灑75%酒精消毒后，在無(wú)菌環(huán)境下，打開(kāi)凍存瓶，用移液器將細(xì)胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中，室溫1200 rpm離心3-5 min，細(xì)胞沉于離心管底部；
（3）培養(yǎng)：將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養(yǎng)基，輕柔懸起細(xì)胞，然后將所有細(xì)胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中，于37℃，5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
（4）觀察：每日觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)（培養(yǎng)基顏色、細(xì)胞貼壁情況、形態(tài)與密度等）并拍照。
傳代
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%開(kāi)始傳代
（1）清洗：無(wú)菌下吸出培養(yǎng)基，用37 ℃預(yù)熱的PBS清洗一次；
（2）消化：加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶令其浸潤(rùn)所有細(xì)胞，室溫（或37 ℃）消化，顯微鏡下觀察到細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化；
（3）離心：用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉(zhuǎn)移至10mL離心管中，在1200 rpm離心3-5 min；
（4）培養(yǎng)：無(wú)菌下棄上清液，加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細(xì)胞并移至T25培養(yǎng)瓶中；按1:2-1:3比例添加完全培養(yǎng)基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養(yǎng)瓶中，于37 ℃，5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
