細胞來源
人臍靜脈內皮細胞（Human umbilical vein endothelial cells）HUVEC來源于新生兒臍帶靜脈血管的內皮，具有典型的“鵝卵石”狀形態。
HUVEC細胞常用于血管生成等相關的研究。（百迪細胞庫產品貨號：C5192）
生長特性：
HUVEC為貼壁細胞、呈內皮細胞樣，具有典型的“鵝卵石”狀形態。
原代HUVEC細胞在體外生長緩慢，傳代次數有限。
細胞在傳代過程中很難保持穩定狀態，隨著傳代次數增多，細胞間粘附分子-1（ICAM-1）的表達逐步下降。
圖片來源：ATCC
培養細節：
① 培養瓶包被：
細胞培養前，細胞瓶要用包被液進行包被，置于37℃培養箱中至少2小時或過夜；包被完成后吸出包被液即可接種細胞；稀釋后的包被液(可4℃保存一周)可回收使用一次。包被液可促進細胞貼壁及生長。
包被液推薦使用重組人纖連蛋白包被液。
② 細胞復蘇：
細胞復蘇后16小時內不要干擾培養，第二天更換以去除殘留的DMSO和未附著的細胞，一般推薦在18-24小時內換液。此后每2-3天更換一次，直到細胞融合至70%左右，狀態較好的情況下會形成鵝卵石或紡錘形形態、無顆粒細胞質，一旦細胞量達到70%，每隔一天更換培養基，直到細胞融合至90%左右。
③ 細胞清洗：
一般推薦使用不含鈣鎂離子的DPBS（貨號：L204-500）進行清洗。
④ 細胞消化：
該細胞消化時，胰酶濃度不宜過高，否則會影響細胞外的標志物，一般推薦的胰酶濃度為0.05%（貨號：A302-500）。該細胞對消化較為敏感，消化時應避免消化過度，一般消化時間為3-4min，注意觀察細胞形態，細胞變圓變亮時即可加入含血清的培養基終止消化。
⑤ 細胞分散：
該細胞尤其脆弱，吹打時不可用力過大。吹打應使用粗口槍頭或粗口膠頭滴管，輕柔吹打10-20次直至細胞顆顆分明即可。
⑥ 細胞傳代：
細胞推薦1:2傳代，傳代后16小時內不要干擾培養，18小時后換液，此后隔天換一次液，細胞生長不能過密，一般融合至80%-90%時即可操作。
⑦ 細胞凍存：
推薦凍存配方為90% FBS+10% DMSO。
注意
該細胞為原代細胞，傳代次數有限。細胞傳代比例過高或傳代次數過多、以及反復凍存都會影響細胞狀態，加速細胞老化，建議從實驗開始一直1:2培養至實驗結束。
圖片來源：百迪細胞庫
Q&A：
問題一 HUVEC不貼壁怎么辦？
首先細胞瓶一定要包被，包被液可提高細胞貼壁效果；
其次培養基中要添加HUVEC細胞生長因子；
然后不能消化過度，HUVEC消化過程中可能會出現第一層細胞下來了，還有一層細胞還在“頑強貼壁”中，此時可分兩次進行消化。
問題二 HUVEC出現多角形、觸角怎么辦？
一般出現這種情況就得看看培養體系是否合適了，培養基的酸堿度是否合適，一般推薦pH 7.0-7.2左右；
還有就是該細胞對血清質量要求較高，盡可能使用進口血清；
細胞生長過程中，還需添加細胞生長因子，提供細胞狀態。推薦使用HUVEC專用完全培養基。
