1951年，當Henrietta Lacks女士尋求治療時，研究人員在她不知情的情況下，從她的身體中提取活檢樣本，然而來自Lacks女士的細胞沒有像過往獲得的細胞一樣迅速在實驗室內死亡，她的細胞快速地進行大量增殖……由此她的細胞成為了第一個“永生”細胞系，現在被稱為HeLa細胞[1]。
無論您是否知道這個傳奇故事，但作為生物研究工作者，對“HeLa”這個名詞一定都有所耳聞，它是細胞系的代表。經過70多年，HeLa細胞系已被發展了18000代，擴增的細胞總質量達到了5000萬噸。目前還沒有任何一種細胞系可以比擬HeLa細胞系，無論是使用的廣泛性和來源的傳奇性。
我們都知道，細胞系是生物科研人了解微觀生命活動的窗口。細胞系可以是研究對象本身，可以是科研工具，可以是生產平臺；或是在科研，或是在醫學，或是在疫苗工廠，處處有細胞系的“發揮空間”。
圖2：細胞培養的關鍵里程碑[2]
如同物種多樣性，擁有更多種類的細胞系，似乎也同時擁有了更多的基因突變多樣性，以及跟多的疾病表征模型。ATCC，DSMZ，CCTCC…種類規模越大的細胞庫就越被科研人艷羨，也在情理之中。
擁有一個龐大的細胞庫，也是實驗室發展的戰略資源之一。那么建立好實驗室獨一無二的細胞庫，應該擁有什么覺悟呢？
吸取歷史經驗教訓
無意間細胞交叉污染
細胞培養操作過程中，無意間的細胞交叉污染（比如搭臺操作，細胞標識錯誤或者細胞來源不清）是一種嚴重的、普遍的且長期存在的問題。
如前言所提到的HeLa，在 20 世紀 70 年代就污染了全世界的大部分細胞和細胞庫[3]。而如今，這種交叉污染問題實際并未根除（圖3，隨著每年文獻發表量以及引用量的增加，和歷史遺留問題，涉及交叉污染的文獻數量反而逐年增加）。
為了應對日益嚴重的交叉污染問題，NIH、ATCC以及多家權威期刊，多次呼吁，要求研究者對細胞進行STR鑒定[4]（這可能意味著，在您遞交文章投稿的同時，也要遞交文中所用細胞的STR報告，屆時再發現細胞存在交叉污染，后果不堪設想）。
圖3：歷年受污染原始文獻的分布情況[4]
差之毫厘，失之千里，因此，在進行建立細胞庫這種源頭工作中，對于入庫細胞的“背調”尤為重要。百迪科技所有交付人源細胞經由STR鑒定，保證您建立細胞庫的源頭準確。
支原體污染
細胞的三個主要微生物污染來源中，支原體污染無疑是隱蔽性最高的，能傳播，且難以清除。支原體污染可能出現在培養過程中的任何環節，包括細胞株源頭，不良的操作習慣，生物安全柜中的層流和氣溶膠等等。支原體可以影響細胞的表型和功能特征，包括：染色體畸變、DNA/RNA合成、膜抗原性變化（細胞性質發生變化）、抑制細胞增殖和代謝（細胞長得慢）、轉染效率降低、基因表達譜的變化（實驗無法重復）、細胞死亡。
支原體污染需要早發現早預防[5]，因此，建庫引入細胞，無疑是防止支原體污染最有效的一環。百迪科技采用cGMP細胞房管理標準，對細胞采用PCR和間接染色雙重檢測法，確保無支原體污染。
戰略發展眼光
作為實驗室長期發展的戰略資源，建立細胞庫的眼光需長遠，細胞系品類多，細胞系“年輕化”都是需要重點考慮的。
建庫細胞種類多
培養成本低，易操作，無限擴增，無倫理問題等優點，使細胞系成為最常用的疾病模型。這就意味著，細胞組織來源越多，實驗室就有越多不同組織疾病的表征手段。而同一組織來源的多種細胞，其實驗數據可互相驗證，提高實驗數據質量。更重要的是，不同的細胞系可能具有不同的突變基因或藥敏性（圖4），對于疾病的表征更為真實，這一點在新藥開發過程中尤為重要。
圖4：不同NSCLC細胞系對EGFR抑制劑具有不同藥敏性[6]
細胞系“年輕態”
雖然傳統觀念認為，細胞代數對于有限細胞的影響更大，但ATCC的一份技術文檔顯示，高代數的細胞系在形態、對刺激的反應、生長速率、蛋白質表達和轉染效率方面都不同于低代數細胞系[7]。甚至，Nat Biotechnol.期刊一文顯示，同一個來源的HeLa細胞系，12代和14代的細胞之間就有731個基因的表達存在顯著差異，并且有166個反應到了蛋白水平上[8]。細胞系代數對于實驗重復性的影響，可見一斑。避免使用傳代次數過多的細胞系，對于實驗結果的可靠性和重復性是十分必要的。因此，百迪科技建議廣大實驗者，建立細胞庫的過程中，要在原始細胞庫和主細胞庫中保存足夠多的細胞系拷貝數量（主細胞庫拷貝份數至少10-20 個，且只用于保存，不用于開發）[9]。
更省心的選擇-百迪科技細胞庫
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配套解決方案
百迪科技擁有一個強大的實驗團隊，不僅提供細胞系，同時還配套最適合細胞系的培養條件，均經過百迪自有細胞實驗室測試，細胞系拿到即養。
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本文參考文獻
[1] https://news.un.org/zh/story/2021/10/1092722
[2] https://www.intechopen.com/chapters/53566
[3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6451928/
[4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29023500/
[5]https://www.atcc.org/the science/authentication/mycoplasma-contamination
[6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27514773/
[7] PASSAGE NUMBER EFFECTS IN CELL LINES
[8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30778230/
[9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25117809/
