| 適用范圍 | 試劑 |
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| 使用方法 | 【適用儀器】 顯微鏡、二氧化碳細胞培養箱、離心機。 【樣本要求】 新鮮采集的羊水細胞或絨毛膜細胞效果最佳。 【檢驗方法】 1. 在無菌條件下抽取妊娠16-21周羊水約20-30ml，平均注入2-3支15ml一次性離心管中。 2. 將含有羊水的離心管以400g 離心10min。 3. 去上清液，每管底約留0.5ml，制成細胞懸液，再加入約3-5ml 羊水細胞培養基，充分混勻，轉移至T25 培養瓶中，置于5% CO2 37℃溫箱進行培養。 4. 一般5 天后鏡下觀察，可見成纖維樣或上皮細胞生長，當細胞生長旺盛，在貼壁細胞層的背景上出現圓形細胞時，視情況（有較好的梭形細胞克隆）可更換上羊水細胞培養基，繼續培養24-48 小時。 5. 終止培養：加入秋水酰胺溶液，使終濃度為0.1μg/ml，4-6（3-4 小時）小時左右進行細胞學處理，胰酶消化后收集細胞懸液，1000rpm離心10min去上清。 6. 低滲：加入約2ml低滲溶液混勻（0.075M KCI），37℃水浴3-5min。 7. 預固定：加入1.5ml新鮮、預冷的固定液（冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液），37℃水浴5min，1800rpm離心10min去上清。 8. 固定：緩慢加入2ml新鮮、預冷的固定液，37℃水浴10min，1500rpm離心10min去上清。 9. 再次固定：加入2ml新鮮、預冷的固定液，37℃水浴10min，離心1500rpm離心10min去上清。 10. 根據管底細胞量適當加入幾滴新鮮固定液。 11. 制片：將細胞液滴在冰凍玻片上，每片1-2 滴。 12. 烤片：75℃烤箱烘烤3 小時（37℃或60℃孵箱中過夜或80℃ 3小時）。 13. 顯帶處理：取胰酶分帶溶液（0.25%）5ml，加入45ml生理鹽水染色缸中（使終濃度為0.025%），用1N HCl或1N NaOH調節pH=7.0，置于37℃預溫，將烤好的玻片標本放入胰酶分帶溶液中處理60s左右（輕輕搖動）。 14. 取出玻片標本，在37℃預溫的生理鹽水中漂洗玻片。 15. 將玻片標本放入37℃預溫的吉姆薩工作液中，染色5-10分鐘。 16. 自來水沖洗，自然晾干后，分析中期染色體并解釋結果。 【陽性判斷值或者參考區間】 細胞倍增指數大于2 【檢驗結果的解釋】 1. 固定液每次使用必須新鮮配制，否則將會形成酯類，形成背景較為明顯，從而影響制片效果。 2. 細胞培養時間、加入秋水酰胺的量以及低滲操作時間等因素都會影響樣品制備效果，需要根據實際樣本及實驗條件進行適當調整。 3. 如果標本來自于妊娠第9個月的患者，則細胞沉淀可能較大但活細胞含量較少，因此需要較大的接種密度（少于正常量的培養基）。 【檢驗方法的局限性】 僅用于培養羊水細胞、絨毛膜細胞。 |
| 注意事項 | 1. 羊水細胞培養基短期內可放4-8℃保存，若長期儲存，應放-20℃保存，不可反復凍融。 2. 本產品只用于體外診斷，操作過程應避免污染；操作人員在檢驗時應做好防護，預防疾病傳播。 3. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 4. 溶液應為澄清，如有沉淀物，嚴禁使用。 5. 禁止使用超出規定有效期的產品。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 培養基應在-20℃避光儲存，有效期為24個月。 |
