適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | 細胞傳代: 1. 取對數生長期的 Vero 細胞,去除舊培養液,加入 PBS 清洗細胞; 2. 去除 PBS,加入適量重組胰酶(覆蓋培養皿表面) 室溫孵育 2~3 min,把單層生長細胞消化下來; 3. 加入雙倍體積的培養基或胰酶終止劑終止細胞消化(如果 Vero 細胞為懸浮培養按照步驟4-6 進行操作); 4. 將消化后的細胞懸液或者懸浮細胞液轉移至離心管中,進行細胞計數; 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min,棄掉上清液。 6. 使用新鮮培養基按 0.4×106/mL 重懸細胞,并將細胞接種至新培養瓶。 培養基適應: 對于含血清培養基培養的細胞株需要做傳代適應,當細胞活率≥95%,細胞倍增時間與對照培養基無明顯差異時,認為培養基適應已經完成。 1. 細胞從含血清培養基,以0.4×106/mL個活細胞的密度接種至含1/3 Vero無血清培養基和2/3原培養基的培養瓶中,置于37℃、5% CO2培養箱中培養。 2. 當細胞密度達到80-90%,存活率≥95%時,以0.4×106/mL個活細胞密度進行傳代,接種至含2/3 Vero無血清培養基和1/3原培養基的培養瓶中培養。 3. 當細胞密度達到80-90%時,存活率≥95%時,以0.4×106/mL個活細胞密度進行傳代,接種至含100%Vero 無血清培養基的培養瓶中培養。 4. 使用100% Vero無血清培養基繼續傳代,細胞倍增時間與原培養基無明顯差異后可用于開展后續生產工作。 |
注意事項 | 1. 液體細胞培養基應置于2~8℃避光保存。 2. 由于本培養基含有谷氨酰胺,如超過 3 個月建議額外補加 3mM。 |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 |