適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | 細胞傳代:
懸浮細胞傳代 1. 預熱昆蟲無血清培養基,100×g離心5min收集細胞,重懸后計數。 2. 以3-5 x 105個活細胞/ml的密度接種于新的培養基。昆蟲細胞對機械剪切很敏感,操作 時動作需要輕柔。 3. 在27°C~28°C的無濕度、空氣調節、無二氧化碳的環境中,置于搖床上以120-140rpm 的轉速培養細胞。 4. 當活細胞密度達到>2×106個活細胞/mL時,進行傳代。 單層細胞傳代 1. 當細胞密度達到 80~90 %時,可以進行傳代。 2. 傳代時不需要使用胰酶消化,棄去培養瓶內舊的培養基和游離的細胞。加入新鮮預熱的 昆蟲無血清培養基,反復吹打5-10次,待細胞不貼壁時即可傳代。吹打時動作要輕柔。 3. 觀察細胞脫落情況,如果有需要,可以用手輕輕拍打瓶壁,幫助細胞解離。 培養基適應: 直接適應: 當細胞存活率≥90%,生長速率處于中對數階段時,可以使用直接適應。單層細胞的直接使 用只需要用新鮮預熱過的昆蟲無血清培養基交換培養基即可。懸浮細胞的直接適應步驟如下: 1. 將細胞懸液以100 x g離心5min,棄上清。 2. 將細胞重懸于新鮮預熱的昆蟲無血清培養基中,細胞以>5×105個細胞/mL的密度接種于 新的培養容器中。 3. 放回培養箱,監測細胞生長情況。如果直接自適應性能不理想,請使用順序自適應。 順序適應 1. 在適應過程中,細胞密度>5×105個活細胞/mL。 2. 將細胞傳代到逐漸增加的昆蟲無血清培養基與原始培養基的比例中(1:3,1:1,3:1, 9:1,然 后是100% 昆蟲細胞無血清培養基。)。在100% 昆蟲細胞無血清培養基中傳代幾次后, 存活細胞數應超過2-4 × 106個細胞/mL,培養4-6天存活率超過85%。 |
注意事項 | 1. 本產品使用過程中應注意無菌操作,避免污染。
2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴禁使用。 3. 為保持本產品的最佳使用效果,請勿進行凍融處理; 4. 禁止使用超出規定有效期的產品。 |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 | 2℃-8°C避光保存,有效期12個月。 |