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人胚腎細(xì)胞-F克隆細(xì)胞(HEK293F)無血清培養(yǎng)基

產(chǎn)品貨號(hào)S108-1000
產(chǎn)品規(guī)格1000ml
目錄價(jià)格 ￥480.00 元
產(chǎn)品編號(hào)S108-1000
百迪全線產(chǎn)品僅供科研使用
產(chǎn)品信息
適用范圍 試劑
使用方法 細(xì)胞傳代：
1. 37℃水浴預(yù)熱 293F 無血清培養(yǎng)基；
2. 從培養(yǎng)箱中取出搖瓶，取少量細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞密度及活力檢測；
3. 按照密度為0.4×106/ml個(gè)細(xì)胞接種至新的搖瓶中，置于37℃、相對(duì)濕度≥80%、CO2含量為8%的培養(yǎng)箱中，搖床（120rpm左右）上培養(yǎng)。
4. 傳代前，如果細(xì)胞密度低于2.0 ×106/mL，或細(xì)胞活率低于80%，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中，800 rpm~1200 rpm離心5分鐘，棄掉上清，使用新鮮培養(yǎng)基按0.4×106/mL重懸細(xì)胞，并將細(xì)胞接種至新?lián)u瓶。
培養(yǎng)基適應(yīng)：
對(duì)于部分細(xì)胞株需要做培養(yǎng)基傳代適應(yīng)，當(dāng)細(xì)胞活率≥95%，細(xì)胞倍增時(shí)間與對(duì)照培養(yǎng)基無明顯差異時(shí)，認(rèn)為培養(yǎng)基適應(yīng)已經(jīng)完成。
1. 當(dāng)細(xì)胞在原培養(yǎng)基中達(dá)到≥2×106/ml(3-4天)，存活率≥90%時(shí)，以0.6×106/mL個(gè)活細(xì)胞的密度接種至含1/3 HEK293F無血清培養(yǎng)基和2/3原培養(yǎng)基的搖瓶中，置于37℃、相對(duì)濕度≥80%、CO2含量為8%的培養(yǎng)箱中，搖床上培養(yǎng)。
2. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到≥3×106/ml(3-4天)，存活率≥90%時(shí)，以0.5×106/mL個(gè)活細(xì)胞密度進(jìn)行傳代，接種至含2/3 HEK293F無血清培養(yǎng)基和1/3原培養(yǎng)基的搖瓶中培養(yǎng)。
3. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到≥3×106/ml(3-4天)，存活率≥90%時(shí)，以0.4×106/mL個(gè)活細(xì)胞密度進(jìn)行傳代，接種至含100%HEK293F無血清培養(yǎng)基的搖瓶中培養(yǎng)。
4. 繼續(xù)傳代2次后可用于轉(zhuǎn)染操作。
蛋白瞬時(shí)表達(dá)：
1. 確保細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前處于健康狀態(tài)，細(xì)胞在傳代前過度生長會(huì)降低轉(zhuǎn)染效率。
2. 提前按需要的密度接種細(xì)胞，以確保細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時(shí)處于合適的匯合度（根據(jù)所使用的轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行調(diào)整）。
3. 使用脂質(zhì)體介導(dǎo)或電穿孔法進(jìn)行轉(zhuǎn)染，將目的基因轉(zhuǎn)染到 293F細(xì)胞系中。
4. 轉(zhuǎn)染完成后，Day1添加5% HEK293F補(bǔ)料，后續(xù)根據(jù)情況再補(bǔ)加一次4g/L的葡萄糖，當(dāng)培養(yǎng)基生產(chǎn)超過3個(gè)月時(shí)，需額外加3mM 谷氨酰胺使用。
注意事項(xiàng) 1. 液體細(xì)胞培養(yǎng)基不宜長時(shí)間光照或熱照，應(yīng)避光保存在2～8℃。
2. 由于本培養(yǎng)基含有谷氨酰胺，如超過3個(gè)月建議額外補(bǔ)加3mM。
聲明 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。
保存條件
產(chǎn)品詳情

BDBIO HEK293F無血清培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分限定的培養(yǎng)基，不含任何蛋白質(zhì)及未定義的 裂解物或動(dòng)物來源成分，配合HEK293F添加物使用，支持293F細(xì)胞的高密度懸浮培養(yǎng)及蛋白、 抗體的表達(dá)生產(chǎn)。