適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | 以下轉染的方法(以 siRNA 為例)已經充分的驗證過,此試劑具有高效的轉染效率,但針對
每種細胞,還是建議實驗人員進行條件優化后展開實驗。
一、細胞準備 1. 根據細胞的生長速度,提前一天鋪板,使細胞密度在轉染當天達到 60%-80%即可。 二、配置轉染復合物 1. 根據說明書,在 Opti-MEM Medium 中稀釋 siRNA 和轉染試劑。 2. 按照 1:1 的比例將稀釋后的 siRNA 加入到稀釋后的轉染試劑中,室溫孵育 5min。 三、細胞轉染 1. 根據說明書,將 siRNA-轉染試劑復合物加入到細胞板中。 2. 將細胞板置于 37℃,5%CO2 培養箱,培養 24-72h,直至進行轉基因表達分析。 (反向轉染比正向轉染更快,是高通量轉染的首選方法。反向轉染的方法是在孔內制備 復合物,然后加入細胞和培養基。由于細胞和 siRNA-轉染試劑復合物是在同一天制備的, 我們建議使用比常規轉染方法多 2.5 倍的細胞。) |
注意事項 | 1. 4 度保存,不可冷凍。避免反復或長時間開蓋,防止脂質體氧化而影響轉染效率。 2. 轉染試劑不宜在室溫放置過久,因此在制備轉染復合物前從冰箱拿出,加完后應立即放 回 4℃再進行后續操作。 3. 轉染復合物制備完成后室溫孵育時間不得超過 20min,因此建議將細胞鋪好板后十字混 勻,暫放于細胞培養箱內,再進行轉染復合物的制備。 4. siRNA 應于-80℃保存。 5. 本產品使用過程中應注意無菌操作,避免污染。 6. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴禁使用。 7. 操作人員萬一與皮膚、粘膜接觸,請立即用清水清洗。 8. 禁止使用超出規定有效期的產品。 |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 | 2-8℃儲存,有效期24個月。 |