| 適用范圍 | 試劑 |
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| 使用方法 | （一）配制即用型凍存液 1. 取新鮮外周血（枸櫞酸鈉抗凝），300g，離心10min。 2. 自體血漿制備： （1）取上半部分2/3的血漿層，放入50ml離心管中，56℃，滅活30min （2）取出離心管，放入-20℃靜置10min （3）取出離心管，4℃，1100g，離心15min （4）取出上面部分澄清血漿層，放入新50ml離心管中 3. 即用型凍存液配制：滅活后血漿：凍存液按照1:4比例混合，即可成即用型凍存液。（例： 800ul凍存液加200ul滅活血漿） （二）細胞凍存及復蘇 1. 人外周血單個核細胞收集 取新鮮人外周血，使用枸櫞酸鈉抗凝后，離體2h內做PBMC分離，參照樣本密度分離液 操作規程分離獲得。 2. 細胞凍存 將收集的PBMC用細胞保存液重懸，使其濃度為1*107/ml（可根據實際實驗需求進行調 整）。分裝至凍存管中，每管1ml，放置于程序降溫盒中緩慢降溫24h，然后置于液氮中 長期保存。 3. 細胞復蘇 （1） 將水浴鍋溫度調至37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內，晃動凍存管直至管中凍存細 胞融化； （2） 將溶化的細胞凍存懸液轉移至含有5-10倍體積完全培養基的離心管中，輕輕混勻； （3） 室溫300g離心10min；去除上清液，加入已回溫的完全培養基重懸細胞，進行細胞計 數，根據計數結果，取適量的細胞懸液接種到新的培養瓶內； （4） 將復蘇好的細胞轉移至37℃，5% CO2培養箱中，按常規方法培養。 |
| 注意事項 | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 2. 請遵守嚴格無菌的工作規范，操作過程避免污染。 3. 使用前應詳細閱讀使用說明書，在有效期內使用。 4. 該凍存液為非即用型凍存液，如果配制成即用型凍存液必須冷凍保存。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2°C-8°C避光保存，有效期18個月； |
