| 適用范圍 | 試劑 |
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| 使用方法 | （一） 細胞凍存 1. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，加入 PBS 清洗細胞； 2. 去除 PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養皿表面） 室溫孵育 2~3 min，把單層生長細胞 消化下來； 3. 加入雙倍體積的完全培養基或胰酶終止劑終止細胞消化（如果凍存細胞為懸浮細胞按照步 驟 4-8 進行操作）； 4. 將消化后的細胞懸液或者懸浮細胞液轉移至離心管中，進行細胞計數； 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min；棄掉上清液。 6. 加入提前預冷好的無血清免疫細胞專用凍存液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，調節凍存液 中細胞的最終密度為 5×105/ml-1×107/ml（供參考，可根據實際需求進行調整）； 7. 將細胞分裝入凍存管中，每管 1～1.5 ml； 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作 者； 8. 將凍存細胞放入-80℃冰箱，24h 后轉入移至-196℃液氮罐長期冷凍保存。（也可適用于 細胞的非程序化凍存及-80℃環境短期保存，更多類型細胞系的簡化操作需驗證后使用）。 （二） 細胞復蘇 1. 將水浴鍋溫度調至 37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內，晃動凍存管直至管中凍存細胞 融化成液體； 2. 將溶解的細胞凍存懸液轉移至含有 5-10 倍體積完全培養基的離心管中，待凍存管中細胞 完全融化后，將凍存細胞懸液緩慢加入離心管中，輕輕混勻； 3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min； 去除上清液，加入已回溫的完全培養基重懸細胞，進行細 胞計數，根據計數結果，取適量的細胞懸液接種到新的培養瓶內； 4. 將復蘇好的細胞轉移至 37℃，5% CO2 培養箱中，按常規方法培養。 |
| 注意事項 | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 2. 請遵守嚴格無菌的工作規范，操作過程避免污染。 3. 本產品適用于多種細胞類型的凍存，凍存使用前可根據實驗需求進行驗證。 4. 使用前應詳細閱讀使用說明書，在有效期內使用。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | -20°C保存，有效期18個月。 |
