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無血清細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品貨號A400-100
產(chǎn)品規(guī)格100ml
目錄價格 ￥360.00 元
產(chǎn)品編號A400-100
百迪全線產(chǎn)品僅供科研使用
產(chǎn)品信息
適用范圍 試劑
使用方法 （一） 細(xì)胞凍存
1. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，加入 PBS 清洗細(xì)胞；
2. 去除 PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面） 室溫孵育 2~3 min，把單層生長細(xì) 胞消化下來；
3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細(xì)胞消化（如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞 按照步驟 4-8 進(jìn)行操作）；
4. 將消化后的細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管中，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；
5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min；棄掉上清液。
6. 加入適量 4℃預(yù)冷的無血清細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞沉淀，制成細(xì)胞懸液（按照細(xì)胞密度和所 用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存液的量，推薦凍存密度：5x105 至 1x107cells/mL。
7. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管 1～1.5 ml； 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作 者；
8. 將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱，24h 后轉(zhuǎn)入移至液氮罐中長期冷凍保存。
（二） 細(xì)胞復(fù)蘇
1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi)，晃動凍存管直至管中凍存細(xì)胞 融化成液體；
2. 將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中，待凍存管中細(xì)胞 完全融化后，將凍存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中，輕輕混勻；
3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min； 去除上清液，加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行細(xì) 胞計數(shù)，根據(jù)計數(shù)結(jié)果，取適量的細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4. 將復(fù)蘇好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中，按常規(guī)方法培養(yǎng)。
注意事項 1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。
2. 請遵守嚴(yán)格無菌的工作規(guī)范，操作過程避免污染。
3. 使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說明書，在有效期內(nèi)使用。
4. 本產(chǎn)品含有 DMSO，建議用戶在低溫條件下（4℃或冰上）進(jìn)行操作，凍存細(xì)胞后應(yīng)盡量 減少凍存細(xì)胞在外存放時間，盡快移入-80℃超低溫冰箱長期保存。
5. 部分對 DMSO 敏感的細(xì)胞，建議使用本產(chǎn)品前對其進(jìn)行試驗性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng)，確認(rèn) 性能后再進(jìn)行正式凍存。
6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時間不宜過長，以免影響凍存效率。
聲明 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。
保存條件 2°C-8°C保存，有效期18個月。
產(chǎn)品詳情

BDBIO 無血清細(xì)胞凍存液是一款即用型無需程序降溫的細(xì)胞凍存試劑。廣泛適用于多種哺乳 動物細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）的凍存。產(chǎn)品經(jīng)過配方優(yōu)化，不含血清、動物源成分，含 有糖、氨基酸、優(yōu)質(zhì)白蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)和更低的 DMSO 含量配比。大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇 率和活力，可用于細(xì)胞長期保存。本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清，降低血清中未知成分和病 毒等感染物質(zhì)給凍存帶來的影響與風(fēng)險，同時，可省去繁瑣費(fèi)時的程序降溫過程，細(xì)胞可重 懸于本產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長期保存，或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個凍存過程。