適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | 樣本凍存方法: 1. 觀察類器官生長情況,當類器官活性良好,每毫升活細胞數不低于 5*105 個時,即可進行 凍存,類器官每管凍存細胞量約為 5*105 個,若細胞量較多時應注意分管凍存。 2. 小心吸走培養孔中的培養基,加入適量 TrypLE,吹散膠滴,37℃培養箱,孵育 3 min, 顯微鏡下觀察類器官消化情況,待類器官消化至 40-60 μm 大小時,即可加入 2-3 倍消 化液體積的 DPBS-PS 終止消化,300g,離心 5 min,棄上清;加入 3mL DPBS-PS 重懸 細胞,300g,離心 5min,棄上清。 3. 加入類器官凍存液重懸沉淀,混合均勻后分裝至標記好的凍存管中,每管 1mL;將凍存 管置于程序降溫盒中,進行梯度降溫:4℃(20 min),-20℃(2 h),-80℃(過夜), 最后轉移至液氮罐。 樣本復蘇方法: 1. 提前準備好 37℃水浴鍋。 2. 提前在超凈臺中取一支 15mL 離心管,加入 9mL 培養基。 3. 將凍存管從液氮罐或-80℃冰箱中取出,在水浴鍋中融化大約 2 min 左右,直至剩下一小 片冰時終止。 4. 將凍存管用酒精消毒后,在超凈臺內打開。將樣本懸液吸出加入到第 2 步準備的離心管中, 將樣本懸液稀釋。 5. 將 15mL 離心管離心、棄上清,用培養基重懸樣本至合適的密度后接種。 |
注意事項 | 1. 本產品使用過程中應注意無菌操作,避免污染。 2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴禁使用。 4. 為保持本產品的最佳使用效果,請勿進行反復凍融; |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 | 4℃保存,有效期 12 個月。 |