使用方法 |
一、薄膠成膠方法:一般用于細(xì)胞遷移和侵襲、原代細(xì)胞擴(kuò)增等。 1.將基質(zhì)膠置于冰上融化后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻基質(zhì)膠成勻漿狀。或根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋,建議濃度不低于1mg/ml。 2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,加入濃度為 50μl/cm2的基質(zhì)膠,平鋪均勻,注意避免產(chǎn)生氣泡。 3.在 37℃放置 30min形成凝膠,即可使用。必要時(shí),吸去上清。 二、厚膠成膠方法:一般用于體外血管生成、主動(dòng)脈環(huán)研究。 1.將基質(zhì)膠置于冰上融化后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻基質(zhì)膠成勻漿狀。或根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋,建議基質(zhì)膠占比>67%。 2.向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入濃度為150-200μl/cm2的基質(zhì)膠,平鋪均勻,注意避免產(chǎn)生氣泡。 3.在37℃放置30min成膠,即可使用。 三、薄層包被方法:一般用于原代細(xì)胞擴(kuò)增。 1.將基質(zhì)膠置于冰上融化后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻基質(zhì)膠成勻漿狀。或根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋,建議濃度不低于0.1mg/ml。 2.將稀釋的基質(zhì)膠包被于所需的培養(yǎng)器皿中,包被量至少覆蓋整個(gè)器皿的生長(zhǎng)表面,搖勻,建議包被量為0.01-0.02mg/cm2。 3.將培養(yǎng)板置于37℃,至少孵育1h,吸去上清即可使用。 四、凝膠包埋方法:一般用于類器官培養(yǎng)、腫瘤球狀體侵襲研究。 1.產(chǎn)品提前解凍備用。 2.準(zhǔn)備所需的細(xì)胞,用基質(zhì)膠重懸,建議基質(zhì)膠占比>70%。 3.向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入15-20μl/cm2的基質(zhì)膠,注意避免產(chǎn)生氣泡。 4.將培養(yǎng)板放置在37℃,30min形成包裹細(xì)胞的凝膠。 5.向培養(yǎng)板內(nèi)添加合適的培養(yǎng)基。 |