| 適用范圍 | 試劑 |
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| 使用方法 | 免疫抑制小鼠成瘤實驗： 1. 將 BDBIO 高濃度低因子基質膠置于冰中并在 4℃過夜融化，使用預冷的移液管或吸頭混 合基質膠至均勻狀態。 2. 收集細胞懸液，調整細胞密度為 2x106 個/ml，置于冰上待用（收集的細胞宜在 1 小時內 接種完畢）。 3. 將 BDBIO 細胞懸液與基質膠按照 1:1 的比例混勻，通常 250μl 含有 2x106 個細胞/ml 的 冰預冷細胞懸液與 250μl 冰預冷的高濃度低因子基質膠混合（注射體積及細胞密度根據 實際實驗條件確定）。 4. 使用實驗動物電動剃毛器對小鼠注射部位皮膚進行脫毛，然后用酒精棉球進行消毒，用 1ml 注射器將細胞懸液與基質膠混合液吸入注射器，進行皮下注射。 5. 注射完畢的小鼠繼續飼養約 1-3 周可觀察成瘤效果。 注：成瘤效果受細胞狀態，小鼠周齡大小，免疫排斥，接種部位等因素的影響，可能會 導致荷瘤不成功的情況。 薄膠成膠方法： 1. 將高濃度低因子基質膠置于冰上融化后，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀，可根據 需要進行稀釋后使用。 2. 將需要使用的培養板置于冰上，加入濃度為 50μl/cm2 生長面積的基質膠。 3. 在 37℃放置 30 分鐘，即可使用。 厚膠成膠方法： 1. 將高濃度低因子基質膠置于冰上融化后，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀，可根據 需要進行稀釋后使用。 2. 將需要使用的培養板置于冰浴，將培養的細胞與基質膠混合，用移液槍頭使其懸浮于基質 中。加入濃度為 150-200μl/cm2 生長面積的基質膠。 3. 在 37℃放置 30 分鐘，可成膠?？梢约尤爰毎囵B的基質，也可使細胞直接生長在膠表面。 薄層包被方法： 1. 將高濃度低因子基質膠置于冰上融化后，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。 2. 根據使用需要，采用無血清培養基稀釋基質膠，根據實驗需要確定最佳包被濃度。 3. 將稀釋的基質膠包被于所需的培養器皿中，包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下 孵育 1 小時。 4. 去除未結合的基質膠，用無血清培養基輕輕地沖洗。 類器官培養方法： 1. 用適量的 4℃過夜解凍的高濃度低因子基質膠重懸細胞或組織沉淀（也可根據實驗條件進 行稀釋后使用），推薦重懸密度為每 50μl 基質膠懸液包含 1×105個細胞，重懸后可置 于冰上，重懸時間不超過 30s 以避免基質膠過早凝固?；|膠稀釋比例應在 70%以上以 保證培養過程中基質膠的結構穩定性。 2. 將基質膠和組織細胞的混合懸液點入預熱的 24 孔板底部正中央，每孔 30μl 左右，避免 懸液接觸孔板側壁。為防止基質膠室溫凝固，此步驟應盡快完成。 3. 將接種完成后的培養板至于 37℃二氧化碳恒溫培養箱中，孵育 15min 左右待基質膠凝固。 4. 待基質膠完全凝固后，沿壁緩慢加入類器官培養基，24 孔板每孔 500ul，避免破壞已凝 固結構。 5. 將 24 孔板置于 37℃二氧化碳培養箱中培養。 6. 每 3 天更換一次培養基，更換培養基時應避免破壞基質膠。 胚胎干細胞 ES 和誘導多能干細胞 iPS 培養： 1. 在冰上融化基質膠，可根據實驗條件稀釋后使用。 2. 在 50 ml 離心管中加入 24 ml 的預冷的 DMEM/F-12，并且放在冰上。 3. 將解融的基質膠按一定稀釋比例加入到預冷的 DMEM/F-12 中（在 50 ml 離心管中）， 混勻。 4. 稀釋好的基質膠溶液必須立即使用，進行培養皿的包被。 5. 輕輕晃動培養皿，將基質膠溶液均勻的覆蓋到培養皿的表面。 注意：如果培養皿的表面沒有被基質膠溶液完全覆蓋，則不能用于人 ES 和 iPS 細胞培養。 6. 培養皿使用前至少在室溫(15-25°C)孵育 1 個小時，不可使基質膠蒸發。 注意：如果不是立即使用，包被好的培養皿必須密封防止基質膠溶液的蒸發，包被后可以 在 2-8°C 放置一周。在使用之前，至少在室溫（15-25°C）中放置 30 分鐘恢復到室溫。 7. 輕輕的將培養皿的一側傾斜，使多余的基質膠溶液在一側的邊緣匯聚。通過移液器或者泵 吸取多余的基質膠溶液。確保包被的表面沒有被刮到。 8. 加入 ES 或 iPS 細胞置于 37℃二氧化碳培養箱中培養。 |
| 注意事項 | 1. 收到產品并確認到貨情況無異常后，請將基質膠儲存于-80℃冰箱，短暫使用可置于-20℃ 冰箱。切勿將基質膠儲存于自動除霜的冰箱中。在第一次融化后請分裝保存，應避免基質 膠反復凍融。 2. 因基質膠在 10℃以上即可成膠，在操作過程中，保持基質膠一直置于冰上，所有接觸的 細胞培養器皿，移液吸頭，分裝管等都必須預冷后使用。 3. 所有操作均需在無菌環境下進行，試劑瓶瓶蓋可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。應使用 預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。 4. 本產品在實際使用過程中須根據實驗目的進行條件優化。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | -20℃至-80℃避光保存，有效期兩年。 |
