| 適用范圍 | 試劑 |
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| 使用方法 | 一、薄膠成膠方法： 1. 將基質膠置于冰上融化后，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。 2. 將需要使用的培養板置于冰上，加入濃度為 50μl/cm2 生長面積的基質膠。 3. 在 37℃放置 30 分鐘，即可使用。 二、厚膠成膠方法： 1. 將基質膠置于冰上融化后，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。 2. 將需要使用的培養板置于冰浴，將培養的細胞與基質膠混合，用移液槍頭使其懸浮于基質中。加入濃度為 150-200μl/cm2 生長面積的基質膠。 3. 在 37℃放置 30 分鐘，可成膠。可以加入細胞培養的基質，也可使細胞直接生長在膠表面。 三、薄層包被方法： 1. 將基質膠置于冰上融化后，用預冷的移液槍頭混勻基質膠成勻漿狀。 2. 根據使用需要，采用無血清培養基稀釋基質膠。根據實驗需要確定最佳包被濃度。 3. 將稀釋的基質膠包被于所需的培養器皿中，包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育 1 小時。 4. 去除未結合的基質膠，用無血清培養基輕輕地沖洗。 四、類器官培養方法： 1. 用適量的 4℃過夜解凍的基質膠重懸細胞或組織沉淀，推薦重懸密度為每 50μl 基質膠懸液包含 1×105 細胞，重懸后可置于冰上，重懸時間不超過 30s 以避免基質膠過早凝固。基質膠稀釋比例應在 70%以上以保證培養過程中基質膠的結構穩定性。 2. 將基質膠和組織細胞的混合懸液點入預熱的 24 孔板底部正中央，每孔 30μl 左右，避免懸液接觸孔板側壁。為防止基質膠室溫凝固，此步驟應盡快完成。 3. 將接種完成后的培養板至于 37℃二氧化碳恒溫培養箱中，孵育 15min 左右待基質膠凝固。 4. 待基質膠完全凝固后，沿壁緩慢加入類器官培養基，24 孔板每孔 500ul，避免破壞已凝固結構。 5. 將 24 孔板置于 37℃二氧化碳培養箱中培養。 6. 每 3 天更換一次培養基，更換培養基時應避免破壞基質膠。 五、胚胎干細胞 ES 和誘導多能干細胞 iPS 培養： 1. 在冰上融化基質膠。 2. 在 50 ml 離心管中加入 24 ml 的預冷的 DMEM/F-12，并且放在冰上。 3. 將解融的基質膠按一定稀釋比例（如 1:100）加入到預冷的 DMEM/F-12 中（在 50ml 離心管中），混勻。 4. 稀釋好的基質膠溶液必須立即使用，進行培養皿的包被。 5. 輕輕晃動培養皿，將基質膠溶液均勻的覆蓋到培養皿的表面。 注意：如果培養皿的表面沒有被基質膠溶液完全覆蓋，則不能用于人 ES 和 iPS 細胞培養。 6. 培養皿使用前至少在室溫（15-25°C）孵育 1 個小時，不可使基質膠蒸發。 注意：如果不是立即使用，包被好的培養皿必須密封防止基質膠溶液的蒸發，包被后可以在 2-8°C 放置一周。在使用之前，至少在室溫（15-25°C）中放置 30 分鐘恢復到室溫。 7. 輕輕的將培養皿的一側傾斜，使多余的基質膠溶液在一側的邊緣匯聚。通過移液器或者泵吸取多余的基質膠溶液。確保包被的表面沒有被刮到。 8. 加入 ES 或 iPS 細胞置于 37℃二氧化碳培養箱中培養。 |
| 注意事項 | 1. 收到產品并確認到貨情況無異常后，請將基質膠儲存于-80℃冰箱，短暫使用可置于-20℃ 冰箱。切勿將基質膠儲存于自動除霜的冰箱中。在第一次融化后請分裝保存，應避免基質 膠反復凍融。 2. 因基質膠在 10℃以上即可成膠，在操作過程中，保持基質膠一直置于冰上，所有接觸的 細胞培養器皿，移液吸頭，分裝管等都必須預冷后使用。 3. 所有操作均需在無菌環境下進行，試劑瓶瓶蓋可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。應使用 預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 |
