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標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠

產(chǎn)品貨號3D200-010
產(chǎn)品規(guī)格10ml
目錄價(jià)格 ￥3400.00 元
產(chǎn)品編號3D200-010
百迪全線產(chǎn)品僅供科研使用
產(chǎn)品信息
適用范圍 試劑
使用方法 一、薄膠成膠方法：
1. 將基質(zhì)膠置于冰上融化后，用預(yù)冷的移液槍頭混勻基質(zhì)膠成勻漿狀。
2. 將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，加入濃度為 50μl/cm2 生長面積的基質(zhì)膠。
3. 在 37℃放置 30 分鐘，即可使用。
二、厚膠成膠方法：
1. 將基質(zhì)膠置于冰上融化后，用預(yù)冷的移液槍頭混勻基質(zhì)膠成勻漿狀。
2. 將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴，將培養(yǎng)的細(xì)胞與基質(zhì)膠混合，用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中。加入濃度為 150-200μl/cm2 生長面積的基質(zhì)膠。
3. 在 37℃放置 30 分鐘，可成膠。可以加入細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)，也可使細(xì)胞直接生長在膠表面。
三、薄層包被方法：
1. 將基質(zhì)膠置于冰上融化后，用預(yù)冷的移液槍頭混勻基質(zhì)膠成勻漿狀。
2. 根據(jù)使用需要，采用無血清培養(yǎng)基稀釋基質(zhì)膠。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要確定最佳包被濃度。
3. 將稀釋的基質(zhì)膠包被于所需的培養(yǎng)器皿中，包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育 1 小時(shí)。
4. 去除未結(jié)合的基質(zhì)膠，用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。
四、類器官培養(yǎng)方法：
1. 用適量的 4℃過夜解凍的基質(zhì)膠重懸細(xì)胞或組織沉淀，推薦重懸密度為每 50μl 基質(zhì)膠懸液包含 1X10^5 細(xì)胞，重懸后可置于冰上，重懸時(shí)間不超過 30s 以避免基質(zhì)膠過早凝固。基質(zhì)膠稀釋比例應(yīng)在 70%以上以保證培養(yǎng)過程中基質(zhì)膠的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
2. 將基質(zhì)膠和組織細(xì)胞的混合懸液點(diǎn)入預(yù)熱的 24 孔板底部正中央，每孔 30μl 左右，避免懸液接觸孔板側(cè)壁。為防止基質(zhì)膠室溫凝固，此步驟應(yīng)盡快完成。
3. 將接種完成后的培養(yǎng)板至于 37℃二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中，孵育 15min 左右待基質(zhì)膠凝固。
4. 待基質(zhì)膠完全凝固后，沿壁緩慢加入類器官培養(yǎng)基，24 孔板每孔 500ul，避免破壞已凝固結(jié)構(gòu)。
5. 將 24 孔板置于 37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
6. 每 3 天更換一次培養(yǎng)基，更換培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)避免破壞基質(zhì)膠。
五、胚胎干細(xì)胞 ES 和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 iPS 培養(yǎng)：
1. 在冰上融化基質(zhì)膠。
2. 在 50 ml 離心管中加入 24 ml 的預(yù)冷的 DMEM/F-12，并且放在冰上。
3. 將解融的基質(zhì)膠按一定稀釋比例（如 1:100）加入到預(yù)冷的 DMEM/F-12 中（在 50 ml離心管中），混勻。
4. 稀釋好的基質(zhì)膠溶液必須立即使用，進(jìn)行培養(yǎng)皿的包被。
5. 輕輕晃動培養(yǎng)皿，將基質(zhì)膠溶液均勻的覆蓋到培養(yǎng)皿的表面。
1. 注意：如果培養(yǎng)皿的表面沒有被基質(zhì)膠溶液完全覆蓋，則不能用于人 ES 和 iPS 細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 培養(yǎng)皿使用前至少在室溫(15-25°C)孵育 1 個小時(shí)，不可使基質(zhì)膠蒸發(fā)。
注意：如果不是立即使用，包被好的培養(yǎng)皿必須密封防止基質(zhì)膠溶液的蒸發(fā)，包被后可以在 2-8°C 放置一周。在使用之前，至少在室溫（15-25°C）中放置 30 分鐘恢復(fù)到室溫。
7. 輕輕的將培養(yǎng)皿的一側(cè)傾斜，使多余的基質(zhì)膠溶液在一側(cè)的邊緣匯聚。通過移液器或者泵吸取多余的基質(zhì)膠溶液。確保包被的表面沒有被刮到。
8. 加入 ES 或 iPS 細(xì)胞置于 38℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項(xiàng) 1. 收到產(chǎn)品并確認(rèn)到貨情況無異常后，請將基質(zhì)膠儲存于--80℃冰箱，短暫使用可置于-20℃ 冰箱。切勿將基質(zhì)膠儲存于自動除霜的冰箱中。在第一次融化后請分裝保存，應(yīng)避免基質(zhì) 膠反復(fù)凍融。
2. 因基質(zhì)膠在 10℃以上即可成膠，在操作過程中，保持基質(zhì)膠一直置于冰上，所有接觸的 細(xì)胞培養(yǎng)器皿，移液吸頭，分裝管等都必須預(yù)冷后使用。
3. 所有操作均需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，試劑瓶瓶蓋可用 71％乙醇擦拭，并自然干燥。應(yīng)使用 預(yù)冷的移液器以保證基質(zhì)膠呈勻漿狀。
聲明 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。
保存條件
產(chǎn)品詳情

基質(zhì)膠是從 Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）小鼠肉瘤提取的可溶性細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，含有 豐富的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，主要包括層粘連蛋白、膠原 IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及 大量的生長因子如 TGF-beta、EGF、IGF、FGF 及腫瘤自身含有的其他生長因子等。BDBIO 標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠在室溫條件下，聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的 結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化，以及對細(xì)胞形態(tài)、生化功能、 遷移、侵染和基因表達(dá)的研究。同時(shí)也適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學(xué)研究，高濃 度的基質(zhì)膠可以用于動物體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞包被。